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线虫研究新技术----NanoLive实时无标记3D显微镜助力线虫(C.elegans)无损伤研究


3D cell Explorer 实时无标记技术对C.elegans活细胞成像的重要性

秀丽隐杆线虫(C.elegans)是生物医学研究中应用最广泛的模式生物之一。当前成像技术的一个主要问题是光毒性,它导致对活细胞动力学观察的干扰,开发新的无标记、高分辨率成像对于更好地理解这种珍贵生物体的解剖学和生理学是至关重要的。

在这里,我们展示了用3D cell explorer对秀丽隐杆线虫无标记成像的视频,即如何克服了上述问题。首先3D cell explorer对样本的照射能量比作为参照物的光片显微镜(~1nW/m2)小100倍(~0.2nW/m2), 极大减少对活细胞的损伤,同时分辨率高达200 nm,因此能对线虫活细胞进行高分辨率和高频率成像。

下面这些视频和图片是来自于柏林马克斯·德布鲁克分子医学中心的弗里德里希·普鲁瑟和尼基塔·弗拉基米罗夫的研究结果。



3D cell Explorer 能对不同胚胎发育阶段的C.elegans 成像

视频中展示了3D cell Explorer对秀丽隐杆线虫早期发育不同阶段实时标记断层3D扫描过程:A.子宫中的未受精卵细胞(右边的绿色箭头)和精子(左边的绿色箭头);C.胚胎期AB:两个细胞之间的隔膜用绿色箭头标记;D.胚胎期AB2:胚胎由4个细胞组成。卵壳清晰可见,用绿色箭头表示;E.胚胎期ABn:胚胎由许多(n)细胞组成。在视野里也可以看到母体的嘴,如绿色箭头所示;F.这种蠕虫的子宫里有两种不同的胚胎以不同的速度发育:底部的AB2和顶部的ABn



3D cell Explorer可对C. elegans生殖系统无标记高清晰成像

下图显示未受精的卵母细胞待在卵巢中,一个接一个地通过精囊转移到子宫,在那里它们与精子相遇并受精。


3D Cell Explorer 在线虫研究中的突出优势

﹡360度旋转光源的全息技术成像;

﹡非侵入式或无需染色标记成像;

﹡无损伤:低功率激光,基于RI的无损伤实时3D 细胞结构成像;

任意的数字染色:高达7色;

纳米级分辨率 :XY=200nm;

﹡超高成像速度:2秒钟快速3D全息成像;

﹡高通量:整合3通道荧光,最高同时10色标记(7DI+3色荧光)