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亲和力检测服务

实验背景

技术原理:表面等离子共振( SPR )技术是目前最经典和精确的分子相互作用检测技术,已有30年的应用历史,可快捷的实时分析DNA与蛋白质之间、蛋白质与蛋白质之间、药物与蛋白质之间、核酸与核酸之间、抗原与抗体之间、受体与配体之间等等生物分子之间的相互作用。

应用领域:SPR在生命科学、医疗检测、药物筛选、食品检测、环境监测、毒品检测以及法医鉴定等领域具有广泛的应用需求。



核心技术原理:

采用传统的SPR原理,具体检测原理图如下:


l 检测两个蛋白质的相互结合性,其中一个蛋白质要用化学方法固定在芯片表面上。

l 另一个蛋白质从流体单元里接近表面上的蛋白质。

l 相互结合性在实时过程包括:结合、解离和表面再生(surface regeneration)。




测试内容:

检测内容:基于SPR原理,实时无标记检测相互作用,可以用于验证结合、亲和力测定、动力学测定、浓度测量

服务流程:

检测平台介绍:

分子互作检测平台使用的是Affinité Instruments设备,该设备由加拿大蒙特利尔大学知名教授Jean-François Masson设计,目前已拥有数项SPR检测技术相关专利: US 8680233, US 8860943, US 898235。并基于SPR原理的研发了新一代非标记分子相互作用分析仪,助力基础研究和临床检验。

以下多款型号设备可根据客户不同的要求选择:





技术优势:

« 技术优势:基于SPR原理,实时、无标记、检测相互作用

« 适用于多种样本:适用于小分子化合物、核酸、多肽、蛋白、抗体、脂类、多糖、纳米颗粒、病毒、微生物、细胞                等各种类型样品

« 速度极快:最快在收到样品后,当天完成测试,获得特异性、亲和力、动力学、浓度等数据

« 适用于复杂样本:可检测各种在复杂溶液之中完成测量,比如血液、牛奶、细胞裂解液等

« 多通道实时监测:多通道同时检测,实时扣除背景,获得可信数据

« 可做动力学检测:可手动进样或者进样泵,泵流速低至25ul/min

« 兼容性较高:可与其它仪器(HPLC,MS等)联合使用

« 价格低:单个实验室即可负担

« 结果稳定:仪器和芯片检测较稳定

« 户外检测:可用于户外环境现场检测,目前已完成多项检测任务

« 应用领域广泛:医疗检测、药物筛选、食品检测、环境监测、毒品检测以及法医鉴定等领域具有广泛的应用需求


应用案例:



一. DNA-蛋白检测——基因调控-Lac 操纵子/Lac 阻遏物

P4SPR 成功地表征了 Lac 操纵子 DNA 及其抑制蛋白的结合相互作用,该系统也可以作

为表征其他生物系统的有用工具,比如 DNA-DNADNA-RNA 和适配体等。

二.小分子检测——在环境水域中进行 RDX 的现场测试

P4SPR RDX 的现场检测提供了卓越的分析能力。它的便携性和稳定性使其适用于各

种环境条件下的现场测试,因此还可以广泛适用于其他污染物的检测。

三.蛋白质-小分子相互作用——跨膜蛋白(TM)的作用机制

P4SPR 为了解跨膜蛋白与信息素刺激的作用机制提供了帮助,并且模块化设计提供了微流控的系统,多通道特性提高了结果的精度,高灵敏度也允许检测低分子量的小分子物质,加上友好的操作界面,P4SPR 非常适用于快速获取实时数据来表征分子间结合的相互作用。

四.蛋白质-蛋白质相互作用

P4SPR 操作的简易性可以让实验者快速评估分析参数,比如固定化方法对受体表面覆盖的影响以及传感效率。它的多通道性也提高了结果的精度,而且具有高灵敏度,非常有利于生物样本中的生物治疗药物的分析。与传统的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术相比,P4SPR 无需对样品进行标记预处理,并且使用试剂的量更少,制备步骤更简洁,可以减少检测的

时间和试剂的成本。

五. 抗体的快速质量检控

P4SPR 作为一种便携式的 SPR 设备可以让科学家更加快速并且容易地获得有价值的动力学和亲和力数据以验证质量,而不影响灵敏度和结合特异性。例如应用 P4SPR 可以轻松确定哪种抗体与 SARS-CoV-2 核衣壳重组蛋白具有最好的结合性能。

六.蛋白质与蛋白质相互作用的快速筛选

P4SPR 还可以进行更多的PPI 筛选,快速、准确的 PPI 筛选能力非常有助于治疗靶点的

发现和药物开发。

七.片段化合物与蛋白质相互作用——药物发现

P4SPR 能够快速评估片段和蛋白质之间的 KD。通过 4 个微流控通道,一次最多注射 4

个重复样品可以获得准确的 KD。相同浓度的样品可以在相同的传感器芯片上进行注射,从

而降低消耗品成本。最重要的是,这些数据显示了在自己的研究实验室中,省去了预定的步

骤,并且连接到我们的 KNX2 模块可以测定 Kon Koff 以提供动力学数据,这是药物设计的重要参数。因此,P4SPR 非常有助于药物发现。

八.疫苗监测——血凝素检测

P4SPR 可以通过固定抗 HA 抗体到芯片上,并使用标准曲线来检测样品中 HA 的数量。

每个样品只需 10 分钟即可获得数据。在疫苗生产过程中,安装一个在线 SPR 仪器来实时评估疫苗批次将是有利的。


样品准备:

适用于小分子化合物、核酸、多肽、蛋白、抗体、脂类、多糖、纳米颗粒、病毒、微生物、细胞等各种类型样品,同时也可检测各种复杂样品,如血液、牛奶等。



相关设备:

我们公司同时代理了Affinite SPR分子互作分析仪,详情请点击下方链接

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